细胞背景:
来源于一名 52 岁男性肥大细胞白血病患者的外周血样本。该细胞有多重亚型分别为:HMC- 1 5C6 ,HMC-1.1 ,
细胞特性:
形态:淋巴母细胞样,悬浮生长。用途:仅供科研使用
培养条件:
1) 准备 IMDM培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。
2) 培养条件: 空气,95%;二氧化碳,5% 。 温度:37 摄氏度,培养箱湿度为 70%-80%
悬浮细胞参考:
大多数悬浮细胞对于环境比较敏感,建议一直维持高密度生长,一般情况下细胞密度维持在 1×10 5 到 1×10 6 个/mL(不同细胞对密度要求不同) 。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中 800-1000rpm,离心 5min,弃去 上清,补加 1-2mL 培养液后重悬混匀后将细胞悬液按 1:2 的比例(首次可以 1:1 分瓶)分到新 T25 瓶中,添加 5-6ml 按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按 1:2 和以上比例 进行。大多数血液类相关的悬浮细胞受运输影响比较大,会出现一批死细胞,如果因此密度降低了,可以离心后 转移至 T25 瓶中竖着培养,培养基添加 5ml 以提高总体密度,隔一天后观察密度可以的话再补液 3ml 完全培养
基后 T25 瓶放倒,等沉淀稳定后观察细胞密度,持续添加培养基等密度上升足够传代为止