IPEC-J2 猪小肠上皮细胞永生化

细胞鉴定： 免疫荧光鉴定已通过

细胞来源： 国内建系

细胞背景 ：小肠黏膜，小肠的管壁分为黏膜层、黏膜下层、肌层和外膜四层。小肠黏膜是最靠近管腔的 一层。由上皮、固有层和黏膜肌层组成。上皮和固有层向肠腔突起形成肠绒毛，上皮向固有 层凹陷形成小肠腺。小肠黏膜的上皮为单层柱状上皮，由吸收细胞、杯状细胞和少量内分泌 细胞组成。小肠腺除上述细胞外，还有潘氏细胞和干细胞。吸收细胞主要功能是消化吸收， 此外也参与分泌性免疫球蛋白 A 的释放。杯状细胞分泌黏液，有滑和保护作用。潘氏细胞 分泌防御素、溶菌酶，对肠道微生物有杀灭作用。内分泌细胞种类多，所分泌的激素参与调 控胃肠活动。干细胞增殖、分化，补充脱落的上皮细胞。固有层的结缔组织含有大量小肠腺， 以及丰富的淋巴细胞、浆细胞、巨噬细胞、嗜酸性粒细胞和肥大细胞。黏膜肌层由内环形和 外纵行两薄层平滑肌组成。

该细胞通过慢病毒转染的方式携带 SV40 基因

l细胞特性 形态：上皮细胞样，贴壁生长

用途：仅供科研使用。

 培养条件 1）准备上皮细胞专用培养基2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37 摄氏度，培养箱湿度为 70%-80%。

注意事项 1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加入 0.25％（

w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA 于培养瓶中（

T25 瓶 1-2mL，T75 瓶 2-3mL），

置于 37℃培养箱中消化 1-2 分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下

观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入 3-4ml

含 10%FBS 的培养基来终止消化。

3.轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 3-5min，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

将细胞悬液按 1：2 的比例分到新 T25 瓶中，添加 6-8ml 按照说明书要求配置的新的完全培养

基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按 1:2~1:5 的比例进行。

3）细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前 3 代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。

4）运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议 T25 培养瓶 1：2 传代 。

 运输形式 低温：1mL 冻存管包装干冰运输，收到后-80 度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现

干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。

常温: T25 瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。

生物安全 1. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，

所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

2. 建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意：冻存管浸没在液

氮中会泄漏，并会慢慢充满液氮。解冻时，液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹

掉其盖子，从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。