u251－luc人类星型胶质细胞瘤LUC 荧光素酶标记（STR鉴定）

U251MG 人类星型胶质细胞瘤    U-373 MG

该细胞为稳转LUC 荧光素酶标记

细胞鉴定

STR鉴定已通过

细胞来源

国家资源库

细胞背景

分离于一位75岁白人男性患者的胶质母细胞瘤组织。通过外植体技术从恶性胶质母细胞瘤肿瘤中获得。U-251 以前以 U-373 MG（ECACC 目录号 89081403）的形式公布，直到短串联重复 (STR)-PCR 分析证实与 U-251 相同。继续表达胶质原纤维蛋白。

https://www.phe-culturecollections.org.uk/products/celllines/generalcell/detail.jsp?refId=09063001&collection=ecacc_gc 

细胞特性

 形态：贴壁细胞

用途：仅供科研使用。

培养条件

1） 准备DMEM高糖培养基；优质胎牛血清，10%；双抗，1%。

2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

注意事项

U251-MG-LUC-PURO细胞puro药筛浓度为0.5ug/ml，培养过程中可不用再添加puro，如若担心抗性随着传代时间降低，可定期用0.25ug/ml浓度puro维持，冻存和传代未贴壁时请勿加药。

对于贴壁细胞传代可以参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。 

3.轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

3）细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。

运输形式

低温:（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。

常温: （2） T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。

生物安全

1. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

2. 建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意：冻存管浸没在液氮中会泄漏，并会慢慢充满液氮。解冻时，液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹掉其盖子，从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。