HBL-1-LUC（人弥漫大B淋巴瘤细胞）(str鉴定）

细胞鉴定 :STR 鉴定已通过

细胞来源: 国家资源库

l 细胞背景 建立与日本 65 岁男性患者，Y 染色体缺失。

www.jstage.jst.go.jp/article/tjem1920/156/4/156_4_319/_article

l 细胞特性 形态：圆形细胞在悬浮液中以单细胞或团块形式生长

用途：仅供科研使用。

l 培养条件
1） 准备：DMEM 培养基，优质胎牛血清 10%，双抗，1%。

2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37 摄氏度，培养箱湿度为 70%-80%。

l 注意事项 该细胞为稳定转染的细胞，随细胞传代次数的增加，其荧光强度会逐渐减弱。若实验要求需

要维持荧光强度，可以加入嘌呤霉素进行再次筛选。建议收到细胞后至少传 3 代，一般常规

前 10 代都不需要筛选，冻存留种后再进行筛选。初次进行细胞筛选时，建议加入终浓度为

1ug/ml 嘌呤霉素的完全培养基维持培养，若无细胞漂浮或者漂浮较少，即可更换为含 2ug/ml

嘌呤霉素的完全培养基继续筛选，以此类推，至最高药物浓度为 5ug/ml。若筛选过程中，漂

浮细胞大于 60%，则停止筛选，换成正常培养基培养，至细胞密度约 80%，可继续加入同浓度

嘌呤霉素进行筛选。当加入 5ug/ml 嘌呤霉素时细胞正常增殖，可停止筛选，用不含药完全培

养基正常培养。

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

悬浮状态下生长的细胞，可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态，一般

情况下细胞密度维持在 1×105~1×106 个/mL（不同细胞对密度要求不同，）可以维持细胞的

正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中 1000rpm，离心 5min，弃去上清，补加

1-2mL 培养液后重悬混匀后将细胞悬液按 1：2 的比例分到新 T25 瓶中，添加 6-8ml 按照说明

书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按 1:2~1:5 的

比例进行。

3）

细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前 3 代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。

l 运输形式 低温:

1mL 冻存管包装干冰运输，收到后-80 度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现

干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。

常温:

T25 瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。

l 生物安全 1. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，

所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

2. 建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意：冻存管浸没在液

氮中会泄漏，并会慢慢充满液氮。解冻时，液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹

掉其盖子，从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。