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无血清培养基(SFM) vs. 血清培养基(含FBS)的对比与应用

发布时间:2025-04-01 点击次数:44

在细胞培养中,选择合适的无血清培养基(Serum-Free Medium, SFM)血清培养基(Serum-Supplemented Medium)取决于实验目的、细胞类型和下游应用。两者各有优缺点,适用于不同场景。


一、基本概念

特性无血清培养基(SFM)血清培养基(含FBS)
主要成分化学成分明确,无动物来源成分基础培养基 + 5-20%胎牛血清(FBS)
生长因子/激素来源添加重组蛋白(如胰岛素、EGF、转铁蛋白)依赖血清中的天然成分
批次差异低(成分固定)高(不同批次血清成分不同)
适用细胞类型特定细胞(如CHO、杂交瘤、干细胞)广谱适用(常规细胞系、原代细胞)
主要用途标准化实验、生物制药、临床研究常规细胞培养、原代细胞扩增

二、无血清培养基(SFM)的优缺点

✅ 优点

  1. 化学成分明确

    • 无动物来源成分,减少外源污染(如病毒、支原体)。

    • 适合药物筛选、基因治疗、疫苗生产等严格要求的实验。

  2. 批次稳定性高

    • 配方固定,实验重复性好,适合工业化生产(如抗体、重组蛋白)。

  3. 减少血清干扰

    • 避免血清中的未知成分影响细胞信号通路研究(如磷酸化检测)。

  4. 符合伦理与法规

    • 适用于临床级细胞治疗(如CAR-T、iPSC分化),避免动物血清引入异源蛋白。

❌ 缺点

  1. 细胞适应性差

    • 部分细胞(如原代细胞、某些肿瘤细胞)在无血清条件下生长受限,需优化配方。

  2. 成本较高

    • 需额外添加生长因子(如bFGF、EGF),价格可能高于血清培养基。

  3. 需要驯化细胞

    • 从含血清培养基过渡到无血清培养基时,细胞可能需要逐步适应(血清逐步降低)。


三、血清培养基(含FBS)的优缺点

✅ 优点

  1. 广谱支持细胞生长

    • 血清提供丰富的生长因子、激素、黏附蛋白,适合大多数细胞系和原代细胞

  2. 使用简便

    • 无需额外优化,直接添加到基础培养基(如DMEM、RPMI-1640)。

  3. 成本相对较低

    • 适合实验室常规培养,尤其是非标准化研究

❌ 缺点

  1. 批次差异大

    • 不同批次的FBS成分不同,可能影响实验可重复性。

  2. 污染风险

    • 血清可能携带支原体、病毒(即使经过处理,仍有潜在风险)。

  3. 干扰实验结果

    • 血清中的未知成分可能影响细胞行为(如迁移、分化)或药物敏感性测试

  4. 伦理与法规限制

    • 临床治疗或生物制药中,动物血清可能不符合GMP要求。


四、如何选择?

1. 优先使用无血清培养基(SFM)的情况

  • 生物制药(如单抗生产、病毒载体制备)。

  • 干细胞培养与分化(如iPSC、MSCs,避免血清诱导自发分化)。

  • 药物筛选与毒性测试(减少血清对药物作用的干扰)。

  • 临床级细胞治疗(如CAR-T、NK细胞培养)。

2. 优先使用血清培养基的情况

  • 原代细胞培养(如肝细胞、神经元,依赖血清中的黏附因子)。

  • 常规细胞系维持(如HeLa、293T,成本低且稳定)。

  • 血清依赖性细胞(如某些杂交瘤细胞)。


五、无血清培养基的常见添加剂

若使用SFM,通常需要补充以下成分(根据细胞类型调整):

添加剂功能示例
胰岛素促进细胞增殖重组人胰岛素(5-10 μg/mL)
转铁蛋白铁离子运输5-50 μg/mL
硒(Na2SeO3)抗氧化,支持贴壁细胞10-50 nM
EGF/bFGF促进干细胞/上皮细胞生长10-20 ng/mL
BSA/HSA提供载体蛋白,稳定生长因子0.1-1%

六、细胞从血清培养基过渡到无血清培养基的方法

  1. 逐步降低血清浓度(如20% → 10% → 5% → 2% → 0%)。

  2. 使用过渡培养基(如含1-2%血清的SFM)。

  3. 优化贴壁因子(如添加纤连蛋白、多聚赖氨酸)。

  4. 监测细胞状态(存活率、增殖速率)。


总结

需求推荐培养基类型
常规细胞培养血清培养基(+5-20% FBS)
标准化实验/生产无血清培养基(SFM)
干细胞/临床研究无血清培养基 + 特定添加因子
原代细胞/难养细胞血清培养基或低血清SFM

最佳策略:根据细胞类型、实验目的和下游应用选择,必要时进行培养基优化


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