在细胞培养中,选择合适的无血清培养基(Serum-Free Medium, SFM)或血清培养基(Serum-Supplemented Medium)取决于实验目的、细胞类型和下游应用。两者各有优缺点,适用于不同场景。
一、基本概念
特性 | 无血清培养基(SFM) | 血清培养基(含FBS) |
---|---|---|
主要成分 | 化学成分明确,无动物来源成分 | 基础培养基 + 5-20%胎牛血清(FBS) |
生长因子/激素来源 | 添加重组蛋白(如胰岛素、EGF、转铁蛋白) | 依赖血清中的天然成分 |
批次差异 | 低(成分固定) | 高(不同批次血清成分不同) |
适用细胞类型 | 特定细胞(如CHO、杂交瘤、干细胞) | 广谱适用(常规细胞系、原代细胞) |
主要用途 | 标准化实验、生物制药、临床研究 | 常规细胞培养、原代细胞扩增 |
二、无血清培养基(SFM)的优缺点
✅ 优点
化学成分明确
无动物来源成分,减少外源污染(如病毒、支原体)。
适合药物筛选、基因治疗、疫苗生产等严格要求的实验。
批次稳定性高
配方固定,实验重复性好,适合工业化生产(如抗体、重组蛋白)。
减少血清干扰
避免血清中的未知成分影响细胞信号通路研究(如磷酸化检测)。
符合伦理与法规
适用于临床级细胞治疗(如CAR-T、iPSC分化),避免动物血清引入异源蛋白。
❌ 缺点
细胞适应性差
部分细胞(如原代细胞、某些肿瘤细胞)在无血清条件下生长受限,需优化配方。
成本较高
需额外添加生长因子(如bFGF、EGF),价格可能高于血清培养基。
需要驯化细胞
从含血清培养基过渡到无血清培养基时,细胞可能需要逐步适应(血清逐步降低)。
三、血清培养基(含FBS)的优缺点
✅ 优点
广谱支持细胞生长
血清提供丰富的生长因子、激素、黏附蛋白,适合大多数细胞系和原代细胞。
使用简便
无需额外优化,直接添加到基础培养基(如DMEM、RPMI-1640)。
成本相对较低
适合实验室常规培养,尤其是非标准化研究。
❌ 缺点
批次差异大
不同批次的FBS成分不同,可能影响实验可重复性。
污染风险
血清可能携带支原体、病毒(即使经过处理,仍有潜在风险)。
干扰实验结果
血清中的未知成分可能影响细胞行为(如迁移、分化)或药物敏感性测试。
伦理与法规限制
在临床治疗或生物制药中,动物血清可能不符合GMP要求。
四、如何选择?
1. 优先使用无血清培养基(SFM)的情况
生物制药(如单抗生产、病毒载体制备)。
干细胞培养与分化(如iPSC、MSCs,避免血清诱导自发分化)。
药物筛选与毒性测试(减少血清对药物作用的干扰)。
临床级细胞治疗(如CAR-T、NK细胞培养)。
2. 优先使用血清培养基的情况
原代细胞培养(如肝细胞、神经元,依赖血清中的黏附因子)。
常规细胞系维持(如HeLa、293T,成本低且稳定)。
血清依赖性细胞(如某些杂交瘤细胞)。
五、无血清培养基的常见添加剂
若使用SFM,通常需要补充以下成分(根据细胞类型调整):
添加剂 | 功能 | 示例 |
---|---|---|
胰岛素 | 促进细胞增殖 | 重组人胰岛素(5-10 μg/mL) |
转铁蛋白 | 铁离子运输 | 5-50 μg/mL |
硒(Na2SeO3) | 抗氧化,支持贴壁细胞 | 10-50 nM |
EGF/bFGF | 促进干细胞/上皮细胞生长 | 10-20 ng/mL |
BSA/HSA | 提供载体蛋白,稳定生长因子 | 0.1-1% |
六、细胞从血清培养基过渡到无血清培养基的方法
逐步降低血清浓度(如20% → 10% → 5% → 2% → 0%)。
使用过渡培养基(如含1-2%血清的SFM)。
优化贴壁因子(如添加纤连蛋白、多聚赖氨酸)。
监测细胞状态(存活率、增殖速率)。
总结
需求 | 推荐培养基类型 |
---|---|
常规细胞培养 | 血清培养基(+5-20% FBS) |
标准化实验/生产 | 无血清培养基(SFM) |
干细胞/临床研究 | 无血清培养基 + 特定添加因子 |
原代细胞/难养细胞 | 血清培养基或低血清SFM |
最佳策略:根据细胞类型、实验目的和下游应用选择,必要时进行培养基优化。