避免细胞细菌污染的预防措施（和你一起避坑）

      首先需要了解您的细胞是什么状态下污染的，如果是传代的时候污染的，就要看污染了多少盘，若全部污染，那么所有的东西重新换过，先排除试剂的原因，等你不再污染，你可以用原来的试剂试一下，如果换了试剂还是污染，那就需要清扫孵箱和房间;如果是其中一盘污染，可能是你自己操作的原因，自己下次需要多多注意，一般我们都是在需要用细胞的时候才会去养，很少是拿来练手的，所以污染的第一时刻就是保证接下来的细胞不要污染，等细胞养起来再慢慢找原因。

        污染的可能原因很多，比如配液消毒问题、操作问题、环境问题等等，如果细胞很多的话，直接扔了重新复苏细胞，如果是保种细胞的话，可购买相关的灭菌试剂。

为了避免损失，我们在做细胞实验之前为了预防细胞被细菌污染需要注意以下几点：

1、实验室应保持清洁、整洁，定期进行消毒处理。使用德国MB公司生产的Mycoplasma Off 不仅能预防支原体污染，也能预防细菌污染。

2、实验台面、培养箱、移液器等设备应定期清洁，确保无菌状态。

3、 实验人员应严格遵守实验室规范，穿戴专用的实验服和手套，避免直接接触细胞培养物。4、实验人员应定期进行手部清洁和消毒，以减少细菌的传播。

5、使用无菌试剂和培养基也是预防细菌污染的关键措施。在试剂和培养基使用前，应进行无菌检查，确保其未被细菌污染。

6、加强对细胞培养物的观察和检测。一旦发现细胞培养物中出现浑浊、异味或细胞形态异常等情况，应立即停止实验，并进行细菌污染的检测。常用的检测方法包括显微镜观察、细菌培养等。一旦确认存在细菌污染，应立即对污染细胞进行清理和消毒，并对实验环境进行重新评估和调整。

不管是什么污染，只要细胞污染，如果不是十分珍贵的细胞，丢弃，重新培养。如果细胞是十分难得，珍贵的细胞，需要挽救的话，建议分别配置含10倍双抗的PBS和5倍双抗的完全培养基各一份。然后先用10倍双抗的PBS洗涤细胞5-10次，然后用5倍双抗的完全培养洗涤细胞3次以上，并在其后每培养1小时换液一次，最后2倍双抗培养基培养过夜，第二天换成一倍双抗完全培养基继续培养，传代两次以上，如未发现污染，即可冻存，并留出部分细胞继续采用无双抗培养基培养48小时以上，最终确定细胞不含有任何污染物。

最重要的是预防！预防！预防！！！