常见的原代细胞污染类型和处理方法。（原代细胞污染后处理步骤？）

1. 原代细胞的定义和种类

　　原代细胞是从生物体内直接分离和培养的细胞，具有较短的寿命和有限的增殖能力。常见的原代细胞包括培养皮肤细胞、血管内皮细胞、神经细胞等。

　　2. 常见的污染源和检测方法

　　细菌、真菌、病毒和其他细胞系是原代细胞常见的污染源。常用的检测方法包括显微镜观察、细菌培养和PCR等分子生物学方法。

　　3. 物理方法处理原代细胞污染

　　物理方法包括细胞分选、细胞培养器具的消毒和细胞冻存等。细胞分选可以通过显微镜观察和手工操作来清除污染细胞。细胞培养器具的消毒可以使用高温、紫外线或化学消毒剂来杀灭污染物质。细胞冻存可以将健康的原代细胞冷冻保存，以备将来使用。

　　4. 化学方法处理原代细胞污染

　　化学方法包括使用抗生素、抗真菌剂和消毒剂来清除污染物质。抗生素可以抑制细菌的生长，抗真菌剂可以杀灭真菌，而消毒剂可以杀灭病毒和其他污染物质。

　　5. 生物学方法处理原代细胞污染

　　生物学方法包括使用细胞毒性试剂、细胞毒性T细胞和免疫细胞等来清除污染细胞。细胞毒性试剂可以选择性地杀死污染细胞，细胞毒性T细胞和免疫细胞可以通过免疫应答来清除污染细胞。

　　6. 预防污染的实用建议和注意事项

　　预防原代细胞污染的关键是严格的无菌操作和细胞培养条件的控制。建议使用无菌技术操作，避免接触污染源，并定期检查细胞培养器具的消毒情况。

原代细胞污染处理流程

1、将污染的培养液倒掉，转烧瓶口，加入10 mlPBS，适当晃动清洗培养瓶，然后倒掉。转烧瓶口。

2、继续加入10mlPBS，同样方法晃动，清洗培养瓶，然后倒掉。

3、继续加入5mlPBS，同样方法洗瓶，主要是培养面，然后倒掉。

4、重复步骤3再洗。

5、重复步骤3再洗。

6、加入3-5ml双抗，洗瓶，静置3-5分钟，然后吸出。

7、原代细胞加入3ml双抗，洗瓶，静置3-5分钟，然后吸出。

8、再加入5mlPBS洗瓶，然后吸出。

9、加入10ml培养液，加入2ml双抗，放置培养箱培养，5小时之后，倒掉培养基，加入PBS洗瓶两次，然后加入胰酶消化，吹打后置于离心机800-1000r/min离心，然后洗一次。置于新的培养瓶里培养，培养体系加入2ml双抗。

10、24h之后，视情况换液，若仍然污染严重，培养基浑浊，重复以上步骤，若看不到污染物，则继续步骤1)、3）、4）、6）、8），然后加入培养液培养，培养体系加入2ml双抗。

11、24h之后，若仍污染严重，可再重复一次，若还污染只能弃之（不过一般没有出现这种情况），若镜下不见污染物，则换液PBS洗瓶，原代细胞正常培养。