选择了含胎牛血清的培养基,在培养过程中,依旧会遇到各种各样的细胞问题!胎牛血清并不是完美的,其体内含有的少量内毒素、补体、抗体等有害成分,如果处理不当,将会严重影响细胞的生长状态甚至导致细胞死亡。细胞培养实验中各个环节都相当重要,在为细胞选择优质的生长环境是养细胞的基础。
所以选择供给细胞营养、维持细胞生长和增殖的多种营养物质经典/基础培养基、无血清培养基以及化学成分确定的培养基等。在这其中,胎牛血清是众多细胞实验的优选。胎牛血清是一种性状、外观 浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。
牛血清在细胞培养中的作用:
1.提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。
2.提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调节它们所结合的物质活力。
3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。
4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。
5.起酸碱度缓冲液作用。
6.提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。
7.参与细胞冻存。
在细胞培养中,胎牛血清加入基础培养基的浓度大多为5%~20%(最常见为10%)的。具体到不同试验,应依据文献报导,或细胞类型或基础培养基的成分来确定适宜浓度。胎牛血清应在-20℃储存,运输应干冰冷链运输,避免反复冻融,确保血清中因子活性不受影响,保证血清优良品质。
选择适用于干细胞、原代细胞,以及其他各类细胞培养,澳洲血源、超低内毒素的牛血清