如何有效的避免细胞培养污染？（细胞培养注意事项和实验心态鼓励帖）

细胞培养过程中细胞污染是很常见的，切莫影响实验心态，可以找一些老师的规范操作视频看看，或许能找到出现污染最主要的原因了。可能不是试剂的问题，或许是手法的问题。大致给大家分享实验室师姐的几点细胞培养的注意事项和做实验需要具备的几点心态。 细胞培养注意事项: 1、PBS、胰酶和培养基从大瓶中分到小管中使用，这样就算污染，也只会污染小管。 2、水浴加热最好保证水浴锅里的水是干净澄清的。然后水浴以后，用纸进行擦拭。放进生物安全柜之前喷洒酒精。 3、杜绝操作过程中手、枪等从管口或者细胞培养皿口上经过，包括垂直吸取试剂。 4、手套要带好，套住袖口。 5、操作过程中，不要频繁摘取手套，随意触摸其他位置。 6、要保证安全柜气流的稳定，操作之前等3-5分钟。 7、枪身不要深入管内。 8、保证安全柜内整齐无菌，不要拥挤然后分无菌，操作和有菌区。 9、不要存在侥幸心理，酒精是中效消毒剂，只能维持短暂的消毒作用，酒精灯使用时间过长会影响安全柜内气流，也会增加污染的风险。还是要改善自己手法，进行严格无菌操作。在确定可能违规操作的情况下，果断舍弃。

10.如果发现污染尽快处理 培养箱要注意灭菌（最少1月一次）如果背景不干净了可以在消化后pbs重悬多洗洗 提高双抗浓度+用左氧氟沙星（1:1000）混合培养

11.有条件的尽量减少水浴锅的使用，水浴锅的地方，环境对细菌太高，也是操作过程中最容易被污染的环节，现在大家都慢慢开始使用金属浴，干燥，卫生，尽可能的降低污染概率。

养细胞或者做实验需要拥有的心态: 1、遇到问题不要逃避，要积极沟通 2、积极寻找解决问题的方法，而不是一味责备和逃避责任，换句话说就是不要一出问题就不敢做实验，也不想找问题或者说找不出问题就过去了。这样容易挫伤自己的自信心，降低自己的执行力，并且一样的问题还会再犯。 3、不要害怕承担责任，不要害怕被师兄师姐和老师骂。重要的是怎么把事情做好。 4、实验失败的时候就好好总结经验，不要让实验结果影响自己的生活和做事的动力。失败乃常事，科研就是要有不怕失败的勇气。 5、千万不要以为你的师兄师姐做实验或者写文章就一定比你好，谁还不是过来人呢？ 7、不要过多的看重结果，而忽略了过程。几乎所有事情是你把这个过程做好了，才会可能得到你想要的结果。 8、不要把你的负面情绪带给别人。首先不要觉得细胞污染是多大一件事，自己犯了多大一件事。其次，不要总跟人抱怨、说烦。

耐心、静心、信心去做一件事一定会成功哦！