-80℃的胎牛血清如何解冻才不会破坏胎牛血清的品质呢？

    在细胞培养实验中，最常用胎牛血清来作为细胞的重要营养来源。正确的使用和保存，对于维持胎牛血清的品质是至关重要。小编在网上阅读了几种解冻方法，今天小编就简单为大家分享两种胎牛血清的解冻方法，建议保存收藏呦！

    众所周知，胎牛血清通常会在- 15℃～ - 20℃条件下保存。在使用时，我们需要将胎牛血清进行解冻，如何正确的解冻，才不会破坏胎牛血清的品质呢？市面上广而流传的胎牛血清的解冻方法有两种，分别是三步法(梯度法)以及常温法。

那我们来看看它们的具体操作吧：

1、三步(梯度法)

三步法(梯度法)根据血清的规格不同，解冻的时间也有差异。

在网络上，小编只找到三种规格的解冻方法，对于小规格的胎牛血清并没有提到解冻方法，三步法解冻并不是对于所有规格的胎牛血清都适用。此外三步法只适用于 -20℃储存的胎牛血清，对于 -80℃储存的血清则需提前几天先转移至-20℃冰箱中（至少24小时），再使用三步法溶解，避免温差过大使血清失活。

2、常温法

1)血清从低温冰取出后，于2-8℃冰箱放置 12-24h，使之部分融解。

2)再将血清置于室温下使之全部融解，在融解过程中需及时规则地轻柔混匀。血清在溶解过程中可能会析出絮状物，这些成分主要是血清中的纤维蛋，是正常现象，对后续的培养无害，不需去除。

常温法不需要多次进行水浴，并且没有根据规格进行时间、温度区分。适用于各个规格的胎牛血清解冻，但解冻所需时间较长。

两种方法各有千秋，我们可以根据自身的实验条件进行选择适合的解冻方法。在解冻时还需注意以下几点：

1、在使用过程中，避免反复冻融。

2、若放于 2℃～8℃冷藏条件下，建议保存时间不宜过长，以免胎牛血清中的营养成分减少或消失。

3、在对胎牛血清进行小规格分装时，请穿实验，佩戴一次性手套，并注意无菌操，防止细菌污染。

4、不要让血清在常温条件下放置太长时间。

对于保存在-80℃的胎牛血清，解冻时需要遵循一定的步骤以确保其质量不受损。以下是一个推荐的解冻方法：

三步法（梯度解冻法）

预解冻：

将血清从-80℃冰箱中取出，先转移至-20℃冰箱中放置至少24小时，这一步是为了减小温差，避免直接升温导致的血清成分失活。

部分解冻：

将血清从-20℃冰箱中取出，然后置于28℃冰箱中放置1224小时，使其部分融解。

完全解冻：

将血清从28℃冰箱中取出，置于室温（1625℃）下，让其全部融解。在融解过程中，需要规则地轻柔混匀血清，但应避免产生泡沫。同时，可以轻微摇晃血清瓶，以避免血清中的蛋白物质凝聚产生絮状物。

注意事项

避免温差过大：

切勿直接将血清从-80℃转移至室温或进行37℃、56℃温水浴解冻，以免温差过大导致血清产生沉淀，影响品质。

处理絮状物：

如果在解冻过程中血清析出絮状物，这通常是血清中的纤维蛋白，属于正常现象，对后续培养无害，无需去除。但如果需要去除，可以采用400g/1~2分钟离心的方法，或将沉淀自然沉淀在瓶子底部后，小心地将血清转移至无菌瓶中。不建议采用过滤方式去除。

及时使用或储存：

解冻后的血清如果一次无法用完，应将其分装在无菌、无热原的容器内密封冷冻储存。已开封或分装后的血清，建议当即配制使用或密封冷冻储存，以避免长时间冷藏或常温下放置导致噬菌体产生。

无菌操作：

在进行血清分装时，应穿实验服、佩戴一次性手套，并严格遵守无菌操作流程，以防止细菌污染。

遵循上述步骤和注意事项，可以确保保存在-80℃的胎牛血清在解冻过程中保持其品质，为后续的细胞培养实验提供稳定的支持。